NY∕T 3080-2017 大白菜抗黑腐病鉴定技术规程(农业)
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ID： |
DF5F0FBEB90747FE9DD27EB4A85E81F9 |
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文件大小(MB)： |
0.37 |
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页数： |
10 |
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文件格式： |
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日期： |
2021-12-23 |
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ICS 65.020,B 16 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3080一2017,大白菜抗黑腐病鉴定技术规程,Rule for evaluation of chinese cabbage resistance to black rot,2017 -06 斗2 发布2017 -10 - 01 实施,中华人民共和国农业部发布,前言,本标准按照GB/ T 1 . 1-2009 给出的规则起草,本标准rl'， 农业部种植业管理司提出.,本标准由全国蔬菜标准化技术委员会CSAC/ TC 467) 归口,本标准起草单位:中国农业科学院蔬菜花卉研究所,本标准主要起草人. 杨字红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、~i?振J ， [、陈同华、凌键,NY/T 3080- 2017,I,NY/T 3080-2017,大白菜抗黑腐病鉴定技术规程,范围,本标准规定了大白菜抗摆脱病(Xanlhomollas canl.户eslns pv. cam卢eSlris) 的鉴定方法和l评价方法.,本标准适用于大白菜(Brassica raμ L. ss~年!!主川is)抗黑腐病的室内鉴定及tí'd1评价,2 规范性引用文件,NY/ T,4,4. 1,4. 11,调至p J-[ 7. O. 于121.C,4. 2. 2 团体培养基.,4 3 育茵基质,---,日期的版本适用于本文,酸碱皮切j,搅拌均匀;)1 溶化后，酸碱皮,将1!(炭、怪石和l来回土按2 ' 1 ' l(体积比)的比例混合均匀，于131 .C 同源蒸汽灭幽30 min .,5 仪器设备,5. 1 恒温摇床,回旋频率范f週 40 r/ min-300 r/ min; 源控范阁。5.C-60.C ,5. 2 恒温培养箱,温度范围。.C-50.C; 温度议动. 士0 . 5.C.,NY/T 3080- 20 17,5. 3 低温冰柜,箱内泪I度， - 1 5'C~ - 25'Co,5. 4 灭菌锅,自拇温冒盟k度范围， O'C~ 13臼5'C; 灭菌H,5. 5 超净工f伟乍台,洁净等级， 100 级@~0 . 5μm ，平均风速， 0 . 25 m/s~O . 6 m/s,5. 6 分光光度计,波长范围200 nm~ l 000 nm ; 波段误差士1 nm; 透射比准确度土0 . 5%('D ,6 黑腐病菌接种体制备,6.1 病原菌分离、保存,6. 11 病原菌分离,取大白菜黑ll峦病发病植株叶Jt病他交界组织，用常规稀释分离法或平板划线分离法分离黑II峦病病原菌,分离物鉴定参!!íl附录A ，确认为野刘l莱黄单胞菌野前IJ菜致病变种( Xa 1'lthomollas cam卢estrzs p认cam卢estris),后，采用稀释涂布平板法进行分离物纯化，经柯赫氏(Koch' s Postulates)法则验证后，保存备用,6.12 病原菌保存,将黑j何?芮í1t-i精养子葡葡1IIi蛋白!国:或YDC 液体踏养i!ili 11" ，在(28 士l) 'C 、150 r/ min 下振荡蜡养24 h,后取培养物于等体积的40 % 甘前11'，"混合均匀，分装在码:存笛内'i1.( - 20 士l) 'C 冰柜中保存; 或将在葡萄,糖蛋白j陈或YDC 培养基上培养的新鲜再豆腐病菌从斜面上洗下或挑下，放入灭菌水中，在室泪下保存， 6,个月重新消化转存1 次.,6. 2 生理小种鉴定,对用于抗病性鉴定接种的病原菌进行生理小种的鉴定，鉴定方法见附录?,6. 3 接种体繁殖和制备,根据育种目的，有创对性地选择优势小利:作为接利1病原菌. 将保存在灭菌水中的菌种摇匀， 移至葡,萄糖蛋白l陈或YDC 液体培养基中，在(28士l) 'C 、1 50 r/ min 下振荡培养24 h ，力11适盘元菌水调整至接种,浓度，制成按手l'液.,7 室内抗性鉴定,7. 1 鉴定对照材料,设北京小杂56 或北京大牛心等易感病品种为感病对HHp~1 牵l' ,7.2 鉴定材料育苗,鉴定材料种子在50'C 热水中处理10 min 后，应于(25 土j) 'C 恒温培养箱中催芽。待种子发芽后惯,于装有育苗基质的塑料育苗钵内，每钵捕利， 1 粒种子。在ìffil室里育苗，室内温皮白天为22'C ~ 25'C ，夜,晚为17'C ~20'C 。选择生辰住tt壮、一致的幼苗用于抗病性鉴定,7. 3 接种,7. 3. 1 接种时期,大向菜生育J归4 叶期~5 11'I.J到.,7. 3. 2 接种浓度,约1 0 ' CFU/m L (OD，∞ = 0 . 2) ,7. 3. 3 接种方法,接种前将植株移到鉴定室内，浇透水并盖膜于15 'C~20'C保湿一夜，相对湿度大于90 % ，使叫缘吐,2,NY/T 3080-2017,馁，第2 天早晨喷雾接种，以叶片布满菌液但无液滴滴落为度。鉴定材料随机或顺序~IF列，每份鉴定材,料重复3 次，每一重复1 0 株苗.,7. 4 接种后管理,接利:后保湿24 h ，相对1~1支大于90 % ，接事l'期间鉴定室ili，l度控制在2S'C - 2 S 'C 范围内，每天光照,12 h -14 h ,B 病情调查,8. 1 调查时闽,接手l'后12d- 1 S d 调查病↑斤，根据此JPj 间感病的对J!!l，Ii'，l'l'病级扩展到感病病级的时间做适当调整.,8. 2 病情级别划分,幼苗病A附分级及其对应的症状t!li述见表1 ,表1 大臼菜抗黑腐病室内鉴定病情级别的划分,病悄级别症状描述,援手1" 叫时片上无任何症状,1 援手1' ''1 水……
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